Expressão gênica em ovócitos suínos de diferentes classificações morfológicas / Gene expression in swine oocytes in different morphological classifications

A produção in vitro de embriões suínos tem alcançado resultados insatisfatórios: ovócitos maturados in vivo produzem uma porcentagem maior de embriões em relação aos maturados in vitro. O sucesso da maturação in vitro está diretamente relacionado com a competência ovocitária. Somente ovócitos competentes são capazes de serem fecundados e terem desenvolvimento embrionário normal. A competência ovocitária pode ser avaliada por vários parâmetros. Recentemente têm sido utilizados como parâmetro os estudos da expressão de genes associados com a competência. O presente trabalho teve por objetivo avaliar diferenças na expressão dos genes BMP15, RYBP, MATER e ZAR1 em ovócitos imaturos de diferentes classes morfológicas, sendo elas: 1, 2, 3 e 4, com a finalidade de proporcionar importantes marcadores moleculares relacionados com a capacidade ovocitária. O RNA total dos ovócitos foi extraído e utilizado como molde para a síntese da primeira fita de cDNA. Os resultados da expressão gênica foram analisados utilizando-se modelo misto, considerando os dados de expressão gênica variável dependente e as classes ovocitárias variáveis independentes. Os genes BMP15, ZAR1 e RYBP apresentaram expressão semelhante nas classes ovocitárias 1, 2 e 3; somente a categoria 4 diferiu na expressão desses genes (P<0,05). O gene MATER foi expresso de forma semelhante em todas as classes ovocitárias estudadas (P>0,05). A técnica de RT-qPCR foi eficiente para detecção desses transcritos em ovócitos de diferentes classes. No entanto, para melhor entendimento do envolvimento desses transcritos na aquisição da competência ovocitária, são necessários mais estudos avaliando ovócitos de diferentes classes morfológicas, em diferentes fases de desenvolvimento, e implicação de outros genes envolvidos com a competência ovocitária.

The in vitro production of pig embryos has achieved unsatisfactory results; in vivo matured oocytes produce a higher percentage of embryos compared to in vitro maturation. The success of in vitro maturation is directly related to oocyte competence. Only competent oocytes are capable of being fertilized and have normal embryonic development. The oocyte competence can be assessed using several parameters. Recently these parameters have been used for gene expression studies associated with competence. This work aimed to evaluate differences in gene expression BMP15, RYBP, MATER, ZAR1 as endogenous control and the constitutive gene GAPDH in immature oocytes of different morphological classes which are: 1, 2, 3 and 4, in order to provide significant molecular markers linked to the ability of development. Oocytes Total RNA was extracted and used as a template for synthesis of the first cDNA strand. The results of gene expression were analyzed using a mixed model, considering the dependent gene expression data and independent ovocitary variable classes. The genes BMP15, RYBP ZAR1 and showed similar ovocitary expression in classes 1, 2 and 3 differ only in category 4 in their expression (P<0.05). The MATER gene was similarly expressed in all ovocitary classes studied (P>0.05). The RTQ-PCR technique was effective for detection of these transcripts in oocytes from different classes. However, for better understanding of the involvement of these transcripts in the acquisition of oocyte competence more studies are needed to evaluate different morphological classes of oocytes at different stages of development and the implication of other genes involved in oocyte competence.

Ultrassonografia testicular em caprinos jovens da raça Alpina / Testicular ultrasonography in young Alpine goats

Objetivou-se com este trabalho observar as mudanças do parênquima testicular de acordo com o fotoperíodo e com a faixa etária dos animais por meio da ecotextura testicular e a viabilidade do uso do ultrassom na avaliação testicular. Foram utilizados 4 animais desde o 6° até o 13° mês de idade. Os exames ecográficos foram realizados a cada 15 dias para avaliar a ecotextura testicular. O parênquima testicular mostrou-se moderadamente ecogênico e homogêneo. Foi observado comportamento semelhante na ecotextura testicular durante o período de avaliação, sendo maior no 8º mês de idade, quando o volume testicular também foi maior; tais mudanças foram relacionadas com o fotoperíodo da região. A avaliação ultrassonográfica dos testículos mostrou-se um método eficiente, capaz de detectar as mudanças no parênquima testicular ao longo do tempo, e como ferramenta alternativa para diferenciação de condições normais e patológicas em caprinos...

The purpose of this study was to observe changes in the testicular parenchyma of male goats. Changes were observed in terms of goat age, evaluating the echotexture and ultrasound viability in the testicles. Four animals were used, ranging from six to 13 months of age. The echographic examinations were performed every 15 days to assess echotexture of the testicle. The testicular parenchyma appeared moderately echogenic and homogeneous. Similar results were observed in testicular echotexture during the evaluation period. The highest results appearing during the eighth month of age, when the testicular volume was also highest; such changes were related to the regional photoperiod. The ultrasound evaluation of the testicles was shown to be an effective method, ultimately capable of detecting changes in testicular parenchyma over time, being an alternative to differentiation normal and pathological conditions in goats...